在細胞培養(yǎng)過程中，支原體感染發(fā)生率達到63%，因而細胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個世界性的難題。細胞培養(yǎng)中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。說起支原體污染，估計細胞培養(yǎng)的同學就開始犯愁了，細胞培養(yǎng)的老手都知道，支原體污染非常不易察覺。有的實驗室被支原體污染后，如果不進行有效*的支原體清除，該實驗的細胞培養(yǎng)很難進行下去，細胞傳代3代以后狀態(tài)就急劇下滑，無法進行正常實驗，有的實驗室甚至只能指望換細胞間。那么怎樣才能有效檢測并清除支原體污染呢?

支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染（一些支原體在人體是正常菌群）、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染；嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素。

如果受到支原體污染時，細胞形態(tài)較之無明顯變化，極易被忽視，往往直到污染非常嚴重時才能發(fā)現(xiàn)。受污染的細胞膜上可能有幾百個支原體，這些支原體競爭營養(yǎng)并釋放有毒的代謝產(chǎn)物，嚴重影響實驗結(jié)果。

對于費力擴增的細胞（如已轉(zhuǎn)染，或經(jīng)過體外刺激），如果細胞中發(fā)現(xiàn)有支原體污染，但此細胞又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)，推薦使用MB公司生產(chǎn)的專li復合抗生素Zell Shield®。

注意：

①每次使用Zell Shield®之前，務(wù)必先用廠家推薦的“懸浮沖洗法"處理細胞，這樣才能達到最佳的支原體祛除效果。

②在祛除細胞支原體污染的過程中，需要環(huán)境、試劑及耗材確保潔凈，無新的支原體污染加入。只要如法操作，在使用Zell Shield®四代后，細胞中的支原體即可祛除。

特點

1) 高效廣譜。Zell Shield®通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成，有效抑制上述微生物的增殖。

2) 安全。無細胞毒性，專li復合支原體敏感抗生素，對大多數(shù)細胞株無毒。

3) 活性穩(wěn)定。在細胞培養(yǎng)期間，Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。

4) 使用方便。Zell Shield®為無菌溶液，可直接加入培養(yǎng)基使用。

用法

1) 在每次使用Zell Shield®之前，細胞傳代時，先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法"處理好細胞，再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細胞，能達到最佳的祛除支原體的效果。（“懸浮沖洗法"的詳細步驟，見下一頁）

2) Zell Shield®常規(guī)為-18℃保存，建議使用前，先融化分裝，仍舊-18℃避光保存，使用時按需融化配置。避免反復凍融。

3) Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基。例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養(yǎng)基使用。