細胞培養(yǎng)基是細胞培養(yǎng)好壞的重要決定因素。近二十年來，無血清培養(yǎng)基越來越受到重視。它不含動物血清或其他生物提取液，仍可使細胞在體外較長時間生長、增殖或維持。它繼天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基之后發(fā)展而來，尤其應用于哺乳動物細胞的大規(guī)模工業(yè)培養(yǎng)。同時，它也是研究細胞生長、增殖、分化及基因表達調控的有力工具。

常規(guī)培養(yǎng)基在基礎培養(yǎng)基中添加了一定量的血清或組織提取物，它存在以下優(yōu)缺點：

優(yōu)點：

(1)血清作為天然培養(yǎng)基，含有豐富全面的細胞生長必需的營養(yǎng)，具有極為重要的功能。

(2)提供維持細胞指數生長的激素、生長因子以及一些低分子營養(yǎng)物。

(3)提供的結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，調節(jié)其活性。

(4)提供的結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用。

(5)是細胞貼壁、鋪展所需的因子來源。

缺點:

(1)血清有時含有細胞生長抑制因子和毒性因子，存在潛在毒性。

(2)血清獲取成本高，價格較貴。

(3)血清由于成分不太明確，，給細胞培養(yǎng)的標準化帶來困難，同時也給細胞表達的目的產物純化帶來困難。

由于常規(guī)培養(yǎng)基存在的上述問題，無血清細胞培養(yǎng)基的開發(fā)和應用漸成趨勢。無血清培養(yǎng)可在很大程度上可以避免血清所帶來的不利，但它同時也有一些不足。其優(yōu)缺點具體如下：

優(yōu)點：

(1) 其組成明確，可避免血清不同批次帶來的質量變動，提高可重復性。

(2)避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染風險。

(3)避免血清不明組分對實驗研究的影響。

(4)有利于體外培養(yǎng)細胞的分化。

(5)可提高細胞產物的表達水平并易于純化。

缺點:

(1)細胞在無血清培養(yǎng)基中易受某些機械和化學因素的影響，培養(yǎng)基的保存和應用不如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。

(2)成本較高。

(3)針對性很強，一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細胞的培養(yǎng)。

(4)無血清培養(yǎng)基由于營養(yǎng)不如血清全面，可能存在潛在的營養(yǎng)不足。

締一生物為您介紹一款可用于Vero細胞無血清培養(yǎng)[1]的SFRE199培養(yǎng)基。它可作為基礎培養(yǎng)基，再添加其他成分后可用于Vero細胞的無血清培養(yǎng)。它對傳統(tǒng)培養(yǎng)基M199進行了改良，開始是用于狒狒原代腎細胞的培養(yǎng)，由生物公司HiMedia公司生產。

SFRE-199系列將M199配方中的部分成分進行了調整：精氨酸增至150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，組氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以獲得較好的細胞生長而未表現(xiàn)出毒性。

SFRE199-1和SFRE199-2二者均含有L-谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖。SFRE M199-2（貨號AT090）含有Earle's鹽，而SFRE M199-1含有Hank鹽。兩種鹽的主要差別在于碳酸氫鈉的水平, 碳酸氫鈉在Eagles (2.2g/L)比在Hanks (0.35g/L) 中高。選用哪種取決于培養(yǎng)環(huán)境中的CO2濃度。

參考文獻

[1] Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

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